研究维氏气单胞菌外膜蛋白免疫原性及对鲤鱼免疫指标的影响

【摘要】为研究维尔氏气单胞菌（ ）外膜蛋白（OMP）的免疫原性，克隆了维尔氏气单胞菌lamB基因，构建了原核表达质粒pET-30a（+）-lamB，转化大肠杆菌BL21（DE3），表达后纯化重组蛋白，采用SDS-PAGE和blot分析鉴定。分别用灭活菌+弗氏佐剂、纯化蛋白、蛋白+弗氏佐剂、PBS免疫鲤鱼，每周检测各试验组鱼血清的免疫指标：酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活性和IgM抗体水平，加强免疫2周后对鲤鱼进行攻毒保护试验。 结果表明，重组蛋白免疫鲤鱼后能产生明显的免疫应答，保护率达84.2%以上，免疫后鲤鱼血清中IgM抗体水平、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及超氧化物歧化酶活性较对照组均明显升高。结果表明，重组蛋白具有良好的免疫原性和保护效果，为进一步研究埃及伊蚊外膜蛋白基因工程疫苗奠定了一定的基础。